Recortar los trozos de ADN del plásmido y unirlos con cinta adhesiva para formar una estructura circular que simule el plásmido. Fotocopia 1.
Haz lo mismo con el ADN celular que contiene el gen de la insulina. Une los distintos trozos pero no lo cierres. Fotocopia 2
Recorta los diferentes enzimas de restricción. Fotocopia 3.
Desliza ahora las enzimas de restricción en paralelo sobre el ADN del plásmido, hasta que encuentres los lugares en los que coincida la secuencia del plásmido con la secuencia reconocida por la enzima. Ayúdate viendo esta animación. Figura 6
Figura 6
Figura 7
Haz un diagrama en el que se representen los siguientes datos:
lugares de actuación de cada enzima de restricción
lugar de inicio de replicación del plásmido
lugares de resistencia a antibióticos.
El diagrama debe quedar similar al de la figura 7.
Localiza del mismo modo, los lugares de restricción en el ADN de la célula que da el gen de la insulina.
Selecciona la enzima adecuada. Recuerda que la enzima debe cumplir estas condiciones:
Que se consiga un fragmento de ADN que contenga entero el gen de la insulina.
Que rompa el plásmido y se pueda obtener un fragmento que contenga
el lugar de inicio de la replicación y al menos un factor de resistencia a antibióticos.
Realiza las roturas apropiadas en el ADN celular y en el plásmido.
Traslada el fragmento del ADN celular que contiene el gen de la insulina al fragmento del plásmido seleccionado. Figura 8 Une los fragmentos con una ADN-ligasa. Ya tienes el plásmido recombinado. FIGURA 9
FIGURA 8
FIGURA 9
El siguiente paso es introducirlo en una bacteria para transformarla. Ésto se consigue mediante varios procesos físicos y químicos, que también se pueden simular lúdicamente en esta experiencia.
Por último, se preparan las cajas Petri y se ponen las bacterias transformadas. Puede ser similar a ésto.(FIGURA 10)
FOTOGRAFÍAS DE ALUMNOS REALIZANDO ESTA ACTIVIDAD
Para ver las fotos ampliadas, sólo hay que hacer "clic" en su icono.
